老有人问，不知道如何操作…今天详细说一下，其实很简单的～ 图上这个问题的出现主要是因为loading buffer浓度或者体积不一致引起的，因为loading buffer里🈶甘油，是有重量的，如果相差很大就会挤压蛋白从而导致变形～ ps：之后给大家分享一个很好用的loading buffer配方❗️ ✅为什么要补齐❓ 蛋白定量后若内参还是不齐，就需要通过调整上样量来使内参一致，上样量相差太大，不补齐的话可能就会出现P1的问题：条带宽窄不一（是可能出现，不是一定会出现！） P1上图上样量相差10ul（依次是15,5,5），没有补齐时，上样量多的最左侧的孔条带就很宽，右侧两个孔条带就比较窄，这种数据是不能用的，而补齐后条带基本就一致了… ✅什么时候应该补齐❓ 样品上样相差太多时，相差大于3ul就建议补齐了。 ✅用什么补齐❓怎么补齐❓ 用制作蛋白样品的那个溶液，也就是loading buffer补齐，样品是几*的loading，就用几*的loading去补。 ➡️怎么补齐？ ❗️举例：若3个孔上样量为10、5、7 第一个孔不变 第二个孔蛋白样品5ul➕空loading buffer 5ul混匀后上样 第三个孔蛋白样品7ul➕空loading buffer 3ul混匀后上样。 这样，就保证点样的蛋白样品质量一致，且体积也一致了～ 🌟（注意用和蛋白样品一样浓度的loading，浓度相差别太大，不然还是会挤压的） 更多关于wb条带的问题大家可以去看P2这条笔记，我总结了蛮多的，都是比较常见的～[扯脸H] 视频版补齐法看P3这条视频，主页直接🔍一下就行。 其他wb相关问题可以看P4提到的合集❗️